Paracoccidioidomicose (PCM) é uma infecção restrita à América Latina, causada por fungos pertencentes ao gênero Paracoccidioides e responsável por altas taxas de mortes prematuras e repercussão socioeconômica, principalmente em segmentos sociais específicos, como os trabalhadores rurais residentes em áreas endêmicas, entre 30 a 50 anos de idade e do sexo masculino. A hipótese que norteia esta proposta é que o polimorfismo do gene CHIT 1 esteja relacionado com a prevalência e agravamento desta micose. Além disso, considerando que a CHIT1, juntamente com a quitosana, ao estimularem de modo positivo o sistema imunológico do hospedeiro, poderá auxiliar o antifúngico a combater a infecção. De modo geral, esta proposta visa obter informações a respeito do papel da quitotriosidase (CHIT1) na infecção fúngica Paracoccidioidomicose (PCM). Em paralelo, objetiva-se obter a CHIT1 recombinante para ser encapsulada em um sistema nanoestruturado para a entrega de fármacos juntamente com o antifúngico sulfametoxazol-trimetrhopim no polímero quitosana. Espera-se que este projeto possa contribuir para o conhecimento científico e, em caso de os resultados serem positivos, a proposta possa servir como como ferramenta para auxiliar na tomada de decisões quanto ao combate e desenvolvimento de uma terapia mais eficiente para as infecções fúngicas, principalmente a PCM.

Objetivo Geral

Investigar o polimorfismo do gene CHIT1 em pacientes diagnosticados com PCM e avaliar o efeito da CHIT1 encapsulada em nanopartículas poliméricas em terapia combinada no tratamento da PCM em modelo murino.

Objetivos Específicos

• Coletar amostras de saliva de pacientes internados em hospitais na região de Goiânia com manifestação clínica da PCM;
• Investigar a expressão da CHIT1 nas amostras de saliva dos pacientes;
• Correlacionar o polimorfismo do gene CHIT1 com a PCM;
• Obter a CHIT1 recombinante;
• Preparar nanopartículas de quitosana contendo a enzima CHIT1 
• Caracterizar as nanopartículas obtidas em função da sua morfologia e das propriedades físico-químicas;
• Avaliar a toxicidade da CHIT1 associada às nanopartículas poliméricas em cultura de macrófagos J774;
• Determinar a Concentração Mínima Inibitória para a CHIT1 livre e/ ou associada em nanopartículas poliméricas e suas combinações com a sulfametoxazol-trimetroprim em cultura de Paracoccidioides spp.
• Induzir a PCM em camundongos; 
• Avaliar o efeito da terapia combinada da CHIT1 associada às nanopartículas poliméricas e da sulfametoxazol-trimetroprim no modelo murinho da PCM.

A PCM possui importância na clínica e na saúde pública, pois pode ser considerada uma infecção oportunista em pacientes imunodeprimidos, como os soropositivos e transplantados, o que aumenta a rapidez da progressão da doença e a sua intensidade [11]. Em áreas endêmicas do Brasil, 5% dos pacientes portadores do vírus HIV apresentam infecção oportunista causada por fungos, incluindo a PCM, sendo que 1,4% das mortes de pacientes com HIV são atribuídas à infecção pela doença.

O tratamento com itraconazol é considerado uma das melhores opções no controle das formas agudas e crônicas da PCM, apresentando melhor atividade que outros medicamentos. Apesar disto, não está disponível na rede pública de muitos estados brasileiros, o que dificulta sua utilização. Em contrapartida, o sulfametoxazol-trimetroprim é uma opção de tratamento combinado que é eficaz na forma crônica da doença e é distribuído gratuitamente pelo Ministério da Saúde do Brasil.